مالٹا کا عظیم محاصرہ 1565 میں اس وقت ہوا جب سلطنت عثمانیہ نے مالٹا کے جزیرے کو فتح کرنے کی کوشش کی، اس وقت نائٹس ہاسپیٹلر کے پاس تھا۔یہ محاصرہ 18 مئی سے 11 ستمبر 1565 تک تقریباً چار ماہ تک جاری رہا۔نائٹس ہاسپٹلر کا ہیڈکوارٹر 1530 سے ​​مالٹا میں تھا، روڈس کے محاصرے کے بعد، 1522 میں عثمانیوں کے ذریعہ روڈز سے نکالے جانے کے بعد۔عثمانیوں نے پہلی بار 1551 میں مالٹا پر قبضہ کرنے کی کوشش کی لیکن ناکام رہے۔1565 میں، عثمانی سلطان سلیمان عظیم نے مالٹا لینے کی دوسری کوشش کی۔نائٹس، جن کی تعداد تقریباً 500 کے قریب تھی اور تقریباً 6000 پیدل سپاہیوں نے محاصرے کا مقابلہ کیا اور حملہ آوروں کو پسپا کیا۔یہ فتح سولہویں صدی کے یورپ کے سب سے مشہور واقعات میں سے ایک بن گئی، یہاں تک کہ والٹیئر نے کہا: "مالٹا کے محاصرے سے بہتر کوئی چیز معلوم نہیں ہے۔"بلاشبہ اس نے عثمانی ناقابل تسخیر ہونے کے یورپی تصور کو ختم کرنے میں اہم کردار ادا کیا، حالانکہ بحیرہ روم پر کئی سالوں تک عیسائی اتحاد اور مسلم ترکوں کے درمیان مقابلہ ہوتا رہا۔یہ محاصرہ بحیرہ روم کے کنٹرول کے لیے عیسائی اتحاد اور اسلامی سلطنت عثمانیہ کے درمیان بڑھتے ہوئے مقابلے کا عروج تھا، یہ ایک مقابلہ تھا جس میں 1551 میں مالٹا پر ترکی کا حملہ، جبربا کی جنگ میں ایک اتحادی عیسائی بیڑے کی عثمانی تباہی شامل تھی۔ 1560، اور 1571 میں لیپینٹو کی لڑائی میں عثمانی کی فیصلہ کن شکست۔