محاصره بزرگ مالت در سال 1565 زمانی رخ داد که امپراتوری عثمانی تلاش کرد جزیره مالت را فتح کند که در آن زمان توسط شوالیه‌ها Hospitaller اداره می‌شد.این محاصره تقریباً چهار ماه، از 18 مه تا 11 سپتامبر 1565 به طول انجامید.مقر Knights Hospitaller از سال 1530 پس از بیرون راندن از رودس، همچنین توسط عثمانی ها، در پی محاصره رودس، از سال 1530 در مالت مستقر بود.عثمانی ها برای اولین بار در سال 1551 تلاش کردند مالت را تصرف کنند اما شکست خوردند.در سال 1565، سلیمان باشکوه، سلطان عثمانی، دومین تلاش خود را برای تصرف مالت انجام داد.شوالیه ها که حدود 500 نفر همراه با حدود 6000 سرباز پیاده بودند، در برابر محاصره مقاومت کردند و مهاجمان را دفع کردند.این پیروزی به یکی از مشهورترین رویدادهای اروپای قرن شانزدهم تبدیل شد، تا جایی که ولتر گفت: "هیچ چیز بهتر از محاصره مالت شناخته شده نیست."این بدون شک به فرسایش نهایی درک اروپایی از شکست ناپذیری عثمانی کمک کرد، اگرچه دریای مدیترانه سال‌ها بین ائتلاف‌های مسیحی و ترک‌های مسلمان به رقابت ادامه داد.این محاصره نقطه اوج یک رقابت فزاینده بین اتحادهای مسیحی و امپراتوری عثمانی اسلامی برای کنترل مدیترانه بود، رقابتی که شامل حمله ترکیه به مالت در سال 1551، تخریب ناوگان مسیحی متحد توسط عثمانی در نبرد جربا در 1560، و شکست قاطع عثمانی در نبرد لپانتو در 1571.