John Knights, eller
Knights Hospitallers , hade erövrat Rhodos i början av 1300-talet efter förlusten 1291 av Acre, det sista
korsfararfästet i Palestina.Från Rhodos blev de en aktiv del av handeln i Egeiska havet, och trakasserade stundtals turkisk sjöfart i Levanten för att säkra kontrollen över östra Medelhavet.Ett första försök från
ottomanerna att erövra ön slogs tillbaka av orden 1480, men den fortsatta närvaron av riddarna strax utanför Anatoliens södra kust var ett stort hinder för ottomansk expansion.En jordbävning skakade ön 1481.Efter belägringen och jordbävningen stärktes fästningen kraftigt mot artilleri enligt den nya skolan för spår italienne.I de mest utsatta sektorerna som vetter mot marken inkluderade förbättringarna en förtjockning av huvudmuren, fördubbling av bredden på det torra diket, i kombination med en omvandling av den gamla motskarpen till massiva utbyggnader (tenailles), byggandet av bålverk runt de flesta torn , och kaponierer som enfilading diket.Portarna reducerades i antal, och de gamla pansarräckena ersattes med lutande sådana som lämpade sig för artilleristrider.
[4] Ett team av murare, arbetare och slavar gjorde byggnadsarbetet, med de muslimska slavarna belastade med det hårdaste arbetet.
[4]1521 valdes Philippe Villiers de L'Isle-Adam till ordens stormästare.I väntan på ett nytt osmanskt anfall på Rhodos fortsatte han att stärka stadens befästningar och uppmanade ordensriddare på andra håll i Europa att komma till öns försvar.Resten av Europa ignorerade hans begäran om hjälp, men Sir John Rawson, Prior of the Order's Irish House, kom ensam.Staden skyddades av två och på sina ställen tre ringar av stenmurar och flera stora bastioner.Försvaret tilldelades i sektioner till de olika språken.Hamninloppet blockerades av en tung järnkedja, bakom vilken ordensflotta låg för ankar.