Pengepungan Besar Malta berlaku pada tahun 1565 apabila Empayar Uthmaniyyah cuba menakluki pulau Malta, kemudian dipegang oleh Knights Hospitaller .Pengepungan itu berlangsung hampir empat bulan, dari 18 Mei hingga 11 September 1565.Knights Hospitaller telah beribu pejabat di Malta sejak 1530, selepas dihalau keluar dari Rhodes, juga oleh Uthmaniyyah, pada tahun 1522, berikutan pengepungan Rhodes.Uthmaniyyah mula-mula cuba menawan Malta pada 1551 tetapi gagal.Pada tahun 1565, Suleiman the Magnificent, Sultan Uthmaniyyah, membuat percubaan kedua untuk menawan Malta.The Knights, yang berjumlah kira-kira 500 bersama-sama dengan kira-kira 6,000 askar berjalan kaki, menahan kepungan dan menghalau penceroboh.Kemenangan ini menjadi salah satu peristiwa paling terkenal di Eropah abad keenam belas, sehingga Voltaire berkata: "Tiada yang lebih terkenal daripada pengepungan Malta."Ia tidak diragukan lagi menyumbang kepada penghakisan akhirnya persepsi Eropah tentang kebal Uthmaniyyah, walaupun Mediterranean terus dipertandingkan antara pakatan Kristian dan Turki Muslim selama bertahun-tahun.Pengepungan itu adalah kemuncak pertandingan yang semakin meningkat antara pakatan Kristian dan Empayar Uthmaniyyah Islam untuk menguasai Mediterranean, pertandingan yang termasuk serangan Turki ke atas Malta pada tahun 1551, pemusnahan armada Kristian Uthmaniyyah di Pertempuran Djerba di 1560, dan kekalahan Uthmaniyyah yang menentukan dalam Pertempuran Lepanto pada 1571.