Nakon rata s Toungooom 1547.–1549., kralj Ayutthaye Maha Chakkraphat izgradio je obranu svoje prijestolnice u pripremi za kasniji rat s Burmancima.Rat 1547–49 završio je sijamskom obrambenom pobjedom i očuvao sijamsku neovisnost.Međutim, Bayinnaungove teritorijalne ambicije potaknule su Chakkraphata da se pripremi za još jednu invaziju.Ove pripreme uključivale su popis stanovništva koji je pripremio sve sposobne muškarce za odlazak u rat.Vlada je uzela oružje i stoku u pripremama za rat velikih razmjera, a Chakkraphat je zarobio sedam bijelih slonova za sreću.Vijest o pripremama ayutthayanskog kralja brzo se proširila i na kraju stigla do Burmanaca.Bayinnaung je uspio zauzeti grad Chiang Mai u obližnjem kraljevstvu Lan Na 1556. Naknadni pokušaji ostavili su veći dio sjevernog Siama pod kontrolom Burme.To je ostavilo Chakkraphatovo kraljevstvo u nesigurnom položaju, suočeno s neprijateljskim teritorijem na sjeveru i zapadu.Bayinnaung je kasnije zatražio dva bijela slona kralja Chakkraphata kao danak dinastiji Toungoo u usponu.Chakkraphat je odbio, što je dovelo do druge invazije Burme na Kraljevstvo Ayutthaya.Vojske Bayinnaunga marširale su do Ayutthaye.Tamo ih je tjednima držala podalje sijamska utvrda, potpomognuta s tri portugalska ratna broda i topničkim baterijama u luci.Osvajači su konačno zarobili portugalske brodove i baterije 7. veljače 1564., nakon čega je utvrda odmah pala.^[43] Sa sadašnjim snagama od 60.000 ljudi u kombinaciji s vojskom Phitsanuloka, Bayinnaung je stigao do gradskih zidina Ayutthaye, snažno bombardirajući grad.Iako nadmoćniji u snazi, Burmanci nisu uspjeli zauzeti Ayutthayu, ali su zahtijevali da sijamski kralj izađe iz grada pod zastavom primirja na mirovne pregovore.Vidjevši da njegovi građani ne mogu još dugo izdržati opsadu, Chakkraphat je pregovarao o miru, ali uz visoku cijenu.U zamjenu za povlačenje burmanske vojske, Bayinnaung je uzeo princa Ramesuana (Chakkraphatov sin), Phraya Chakri i Phraya Sunthorn Songkhram natrag sa sobom u Burmu kao taoce, te četiri sijamska bijela slona.Mahathamraja, iako izdajnik, trebao je biti ostavljen kao vladar Phitsanuloka i potkralj Sijama.Kraljevstvo Ayutthaya postalo je vazal dinastije Toungoo, od kojega se zahtijevalo da godišnje daje trideset slonova i tri stotine mačaka srebra Burmancima.