Ang Spanish Florida ay itinatag noong 1513, nang inangkin ni Juan Ponce de León ang peninsular Florida para saEspanya noong unang opisyal na ekspedisyon ng Europa sa North America.Ang pag-angkin na ito ay pinalaki nang ilang explorer (lalo na sina Pánfilo Narváez at Hernando de Soto) ay dumaong malapit sa Tampa Bay noong kalagitnaan ng 1500s at gumala hanggang sa hilaga ng Appalachian Mountains at hanggang sa kanluran ng Texas sa halos hindi matagumpay na paghahanap ng ginto.^[14] Ang presidio ng St. Augustine ay itinatag sa baybayin ng Atlantiko ng Florida noong 1565;isang serye ng mga misyon ang itinatag sa buong Florida panhandle, Georgia, at South Carolina noong 1600s;at ang Pensacola ay itinatag sa kanlurang Florida panhandle noong 1698, na pinalalakas ang pag-angkin ng mga Espanyol sa seksyong iyon ng teritoryo.Ang kontrol ng Espanyol sa peninsula ng Florida ay higit na pinadali ng pagbagsak ng mga katutubong kultura noong ika-17 siglo.Ilang grupo ng Katutubong Amerikano (kabilang ang Timucua, Calusa, Tequesta, Apalachee, Tocobaga, at mga taong Ais) ay matagal nang naninirahan sa Florida, at karamihan ay lumalaban sa mga paglusob ng Espanyol sa kanilang lupain.Gayunpaman, ang salungatan sa mga ekspedisyon ng Espanyol, mga pagsalakay ng mga kolonista ng Carolina at ng kanilang mga katutubong kaalyado, at (lalo na) mga sakit na dinala mula sa Europa ay nagresulta sa isang matinding pagbaba sa populasyon ng lahat ng mga katutubo ng Florida, at ang malalaking bahagi ng peninsula ay halos hindi nakatira. sa unang bahagi ng 1700s.Noong kalagitnaan ng 1700s, ang maliliit na banda ng Creek at iba pang mga Native American na refugee ay nagsimulang lumipat sa timog sa Spanish Florida matapos na sapilitang paalisin ang kanilang mga lupain ng mga pamayanan at pagsalakay ng South Carolina.Kalaunan ay sinamahan sila ng mga African-American na tumatakas sa pagkaalipin sa mga kalapit na kolonya.Ang mga bagong dating na ito - at marahil ang ilang nabubuhay na inapo ng mga katutubong Florida - sa kalaunan ay pinagsama sa isang bagong kultura ng Seminole.