Matapos ang kanyang tagumpay sa Chancellorsville sa Virginia noong Mayo 1863, pinangunahan ni Lee ang kanyang hukbo sa Shenandoah Valley upang simulan ang kanyang pangalawang pagsalakay sa North—ang Gettysburg Campaign .Sa mataas na espiritu ng kanyang hukbo, nilayon ni Lee na ilipat ang pokus ng kampanya sa tag-araw mula sa sinalanta ng digmaan sa hilagang Virginia at umaasa na maimpluwensyahan ang mga pulitiko sa Hilaga na talikuran ang kanilang pag-uusig sa digmaan sa pamamagitan ng pagtagos hanggang sa Harrisburg, Pennsylvania, o maging sa Philadelphia.Itinulak ni Pangulong Abraham Lincoln, inilipat ni Major General Joseph Hooker ang kanyang hukbo sa pagtugis, ngunit na-relieve sa command tatlong araw bago ang labanan at pinalitan ni Meade.Ang mga elemento ng dalawang hukbo ay unang nagbanggaan sa Gettysburg noong Hulyo 1, 1863, habang si Lee ay apurahang nagkonsentrar ng kanyang mga pwersa doon, ang kanyang layunin ay upang makisali sa hukbo ng Unyon at sirain ito.Ang mga mababang tagaytay sa hilagang-kanluran ng bayan ay unang ipinagtanggol ng isang Union cavalry division sa ilalim ng Brigadier General John Buford, at hindi nagtagal ay pinalakas ng dalawang corps ng Union infantry.Gayunpaman, sinalakay sila ng dalawang malalaking Confederate corps mula sa hilagang-kanluran at hilaga, na gumuho sa mabilis na nabuong mga linya ng Union, na nagpapadala sa mga tagapagtanggol na umatras sa mga lansangan ng bayan patungo sa mga burol sa timog lamang.Sa ikalawang araw ng labanan, karamihan sa dalawang hukbo ay nagtipon.Ang linya ng Union ay inilatag sa isang defensive formation na kahawig ng isang fishhook.Noong huling bahagi ng hapon ng Hulyo 2, naglunsad si Lee ng matinding pag-atake sa kaliwang bahagi ng Union, at ang matinding labanan ay naganap sa Little Round Top, Wheatfield, Devil's Den, at Peach Orchard.Sa kanan ng Union, ang mga demonstrasyon ng Confederate ay lumaki sa malawakang pag-atake sa Culp's Hill at Cemetery Hill.Sa buong larangan ng digmaan, sa kabila ng malaking pagkatalo, ang mga tagapagtanggol ng Unyon ay humawak ng kanilang mga linya.Sa ikatlong araw ng labanan, ipinagpatuloy ang labanan sa Culp's Hill, at ang mga labanan ng mga kabalyero ay sumiklab sa silangan at timog, ngunit ang pangunahing kaganapan ay isang dramatikong pag-atake ng infantry ng 12,500 Confederates laban sa gitna ng linya ng Union sa Cemetery Ridge, na kilala bilang Pickett's Charge. .Ang singil ay tinanggihan ng Union rifle at artillery fire, sa malaking pagkawala ng Confederate army.Pinangunahan ni Lee ang kanyang hukbo sa isang napakahirap na pag-urong pabalik sa Virginia.Sa pagitan ng 46,000 at 51,000 na sundalo mula sa magkabilang hukbo ang nasawi sa tatlong araw na labanan, ang pinakamahal sa kasaysayan ng US.Noong Nobyembre 19, ginamit ni Pangulong Lincoln ang seremonya ng dedikasyon para sa Gettysburg National Cemetery upang parangalan ang mga nasawing sundalo ng Unyon at muling tukuyin ang layunin ng digmaan sa kanyang makasaysayang Gettysburg Address.